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有了它,实验室的亲和标签都可以扔掉了

四正柏 2019-07-03 19:39:47

IBA Lifesciences公司总部位于德国,致力于生命科学研究,以提供高质量的产品及服务为使命。其杰出的专利技术Strep-tag®系统已成为重组蛋白技术中领先的纯化系统之一。IBA以Strep-tag®系统为基础,发展出完整的产品体系,涵盖重组蛋白的表达、纯化与固定,以及从全血或相关体液中分离特定细胞的技术(Western blot, ELISA, Immunofluorescence, FACS etc.)。


Strep-tag®较目前使用率最高的His-tag,蛋白的纯化纯度以及应用范围有极大的提高。


mCherry与GAPDH的SDS-PAGE图


在天然条件下纯化mCherry和GAPDH的SDS-PAGE分析。(上图左)Ni-NTA:His6-标签系统(上图右)Strep-Tactin®XT:Twin-Strep-tag®系统。根据蛋白质印迹分析,用Strep-Tactin®XT进行mCherry纯化的残留杂质是共纯化的降解产物,并且明显可以发现使用Twin-Strep-tag®系统的纯化效果更佳,杂质更少。


1Strep-tactin®纯化系统产品优势


1、超高的蛋白纯度(Strep-Tactin®XT可在变性条件得到高纯度),只需要一步纯化过程即可得到高纯度蛋白(高达99%),可大大减少纯化的时间和人力成本。


2、两种标签都能融合到N-或C-末端,对重组蛋白活性和功能都无影响,因此在接下来的实验中可不用移除标签。


3、普通的生理缓冲条件(不需调节PH),有温和的可逆转能力,高度保障生物蛋白活性,其系统的高特异性可实现超低背景。


4、可实现多种特殊蛋白的纯化(如金属蛋白,膜蛋白),多次洗涤也不会造成目标蛋白的流失。 


5、纯化填料具有可再生性(可重复利用3-5次)



2Strep-tactin®系列产品


产品目录号

产品名称

规格

2-1201-***

Strep-Tactin®   Sepharose® 50% suspension

4/20/50   ml

2-1206-***

Strep-Tactin®   Superflow® 50% suspension

4/20/50   ml

2-1208-***

Strep-Tactin®   Superflow® high capacity 50% suspension

4/20/50   ml


为了将Strep-tag®系统更完美,IBA一直在进行优化,第三代Strep-tag®系统的Twin-Strep-tag®与Strep-Tactin®XT近共价键的结合,有着超高的亲和力,能在pM亲和度范围内结合,经过多次洗涤也不会产生任何损失。Strep-Tactin®XT相比于上一代Strep-Tactin®有着更高的目标蛋白产量(在某些蛋白中能达到近2倍)。



Strep-Tactin®与Strep-Tactin®XT的总体纯化过程是相同的(如下图)。仅有两个小的变化:


①Strep-Tactin®XT洗脱时需用生物素来进行,而Strep-Tactin®是使用脱硫生物素


②对Strep-Tactin®XT resin的再生是使用10mM NaOH来实现,而Strep-Tactin®是通过HABA


Strep-Tactin®与Strep-Tactin®XT纯化过程示意图



3Strep-tactin®XT系列产品



产品目录号

产品名称

规格

2-4010-***

Strep-Tactin®   XT Superflow® 50% suspension

4/20/50   ml

2-4030-***

Strep-Tactin®XT   Superflow® high capacity 50% suspension

4/20/50   ml

2-4090-002

MagStrep   "type3" XT beads 5% suspension

2  ml


四正柏

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