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质谱界大咖Orbitrap---全面助力您的高分辨分析服务

纳米生化平台 2019-06-11 02:39:27

Orbitrap(静电场轨道阱)无疑是近20年来质谱技术上最重要的发明,该技术彻底革新了质谱分析方法。苏州纳米所纳米生化平台新近采购的Q Exactive Plus高分辨液质分析系统(LC-MS/MS)为Thermofisher最新推出的四级杆和静电场轨道阱杂交高分辨质谱仪,配有ESI源,Nano ESI源、APCI源,并有Dionex Ultimate 3000和NanoEasy-nLC两套液相系统满足您不同的需求。

  

Q Exactive Plus 组合型四级杆Orbitrap 质谱仪

 

设备结构及技术特点      


Q Exactive Plus整体内部结构示意图 

1.   离子源:配有HESI-II第二代加热型ESI源,APCI源及nanoESI源,方便切换。

2.   离子传输部件:配有S-lens,高效的离子传输提供更佳灵敏度,可发现更多分析物。

3.   主四级杆:采用Thermofisher专利的双曲面四极杆。

4.   C-trap:可实现离子聚焦,提高检测灵敏度,提供最佳质谱动态范围。

5.   HCD高能裂解池:高效的MS/MS裂解过程,可得到更为全面的谱图。

6.   Orbitrap静电场轨道阱:Q Exactive Plus的核心,具有高质量分辨率和无可比拟的谱图质量,m/z 200下高达140,000的分辨率以及 < 1ppm的质量精度可实现非常可靠的鉴定。

应用方向:

药物代谢组学、蛋白质组学、环境分析、食品安全、毒物学以及临床研究应用。

复杂基质下,有机物的高分辨率、高精度的鉴定。

有机小分子精确分子量鉴定。

生物制药结构表征,蛋白翻译后修饰分析。

蛋白和代谢物鉴定

……

 

应用举例:蛋白质药物(如单抗)结构表征

1、完整蛋白分子量测定:

完整分子量测定是蛋白质药物产品(如单抗)研发与质控中最常进行的分析项目, 在完整单抗分析中,Orbitrap准确度一般为10ppm内(以单抗分子量15万KD计算,10ppm约相当于1.5Da)并能清晰地显示出单抗几种主要糖型组合。

 



某单抗完整分子量原始质谱图及去卷积后的分析结果

2、肽图分析:

在蛋白质药物产品的质控要求中,需要对蛋白氨基酸序列进行确证,对相关修饰进行鉴定以及定量——即肽图分析。Orbitrap结合专业生物制药类BioPharma Finder软件可实现肽段序列确认、覆盖率分析、修饰位点鉴定与定量、错配二硫键发现、图谱对比、CID/HCD碎片解析、未知修饰发现与氨基酸突变查找等功能。

BioPharma Finder软件生成的肽图覆盖率报告

3、糖基化分析

糖基化对蛋白药物的疗效、稳定性及免疫原性具有重要影响。Orbitrap具有10万以上的超高分辨率和amol级的超高灵敏度,结合高能碎裂(HCD)模式,能获得丰富的碎片信息可实现从糖链结构分析到糖基化位点鉴定再到糖肽解析的完整分析流程。


某单抗糖肽EEQYNSTYR二级谱图解析

4、二硫键分析

利用Orbitrap高分辨质谱的超高分辨率、灵敏度和质量精度,可以为生物制药分析提供更加快速、灵敏、准确的二硫键信息。


某单抗二硫键解析

 

该设备目前已完成安装调试进入试运行,并已全面对外开放。欢迎所内外感兴趣的老师和同学来电或邮件咨询。详情请登录纳米生化平台网站http:nmshpt.sinano.ac.cn

联系人: 孙冰  bsun2007@sinano.ac.cn, 0512-62872940/62872876