生物大分子分离纯化?Giga介质了解一下

2023-05-10 14:56:27

Giga-media系列介质

特别适合于抗体等大尺寸蛋白,及较小尺寸的类病毒颗粒的分离纯化,能够有效保持蛋白活性结构的完整性和活性。



 
 
 

 Giga-P系列介质为亲水修饰聚合物骨架,具有机械强度高、流速快、反压小、非特异性低等优点。孔径为100-200 nm,可提供疏水介质(丁基、苯基)、离子交换介质(DEAE/SP),特别适合于抗体等大尺寸蛋白,及较小尺寸的类病毒颗粒的分离纯化,能够有效保持蛋白活性结构的完整性和活性。


Giga-V系列介质的骨架为亲水修饰聚合物骨架,具有机械强度高、流速快、反压小、非特异性少等优点。孔径在500-1500nm范围内可控,可提供疏水介质(丁基、苯基)、离子交换介质(DEAE/SP),特别适合于大尺寸病毒和类病毒颗粒的分离纯化,如口蹄疫病毒、腺病毒、质粒等,能够有效保持病毒颗粒结构的完整性和蛋白活性,提高产品活性收率。


Giga V-DEAE


参数

指标

化学特性

弱阴离子介质(DEAE)

骨架材料

P(GMA-EDMA)

外观

球形

平均粒径

30-70   um

平均孔径

700   nm

交换容量

0.1-0.5   mmol/ml wet gel

最高流速

12000 cm/h,25

pH稳定性

2-13(长时间);1-14(短时间)

化学稳定性

1M   NaOH、0.01M HCl、6M盐酸胍、8M脲浸泡7天,性能无变化

物理稳定性

溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%

保存

4-30℃ (20%乙醇)

 


Giga P-DEAE


参数

指标

化学特性

弱阴离子介质(DEAE)

骨架材料

P(GMA-EDMA)

外观

球形

平均粒径

30-70   um

平均孔径

100   nm

交换容量

0.1-0.5   mmol/ml wet gel

最高流速

9000 cm/h,25℃

pH稳定性

2-13(长时间);1-14(短时间)

化学稳定性

1M   NaOH、0.01M HCl、6M盐酸胍、8M脲浸泡7天,性能无变化

物理稳定性

溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%

保存

4-30℃ (20%乙醇)

 

 


Giga P-SP


参数

指标

化学特性

强阳离子介质(SP)

骨架材料

P(GMA-EDMA)

外观

球形

平均粒径

30-70   um

平均孔径

100nm

交换容量

0.1-0.5   mmol/ml wet gel

最高流速

9000 cm/h,25℃

pH稳定性

2-13(长时间);1-14(短时间)

化学稳定性

1M   NaOH、0.01M HCl、6M盐酸胍、8M脲浸泡7天,性能无变化

物理稳定性

溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%

保存

4-30℃ (20%乙醇)



Giga V-SP


参数

指标

化学特性

强阳离子介质(SP)

骨架材料

P(GMA-EDMA)

外观

球形

平均粒径

30-70   um

平均孔径

700   nm

交换容量

0.1-0.5   mmol/ml wet gel

最高流速

12000 cm/h,25

pH稳定性

2-13(长时间);1-14(短时间)

化学稳定性

1M   NaOH、0.01M HCl、6M盐酸胍、8M脲浸泡7天,性能无变化

物理稳定性

溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%

保存

4-30℃ (20%乙醇)




Giga系列微球的提出:

扩散传质→对流传质+扩散→分离速度提高6倍




a.琼脂糖微球                            b.Giga系列微球





Giga系列微球特点:


  1. 超大孔结构,孔径可根据目标分子大小进行调控

  2. 生物大分子分离纯化专用介质

  3. 高流速、高载量、高活性收率





应用实例


Giga P-DEAE纯化某兽用病毒疫苗(X)


某兽用病毒疫苗是一种稳定性差的病毒抗原,在纯化过程中与层析介质作用后容易发生裂解,而裂解后会几乎丧失其全部的免疫原性。因此在层析过程中,介质对此兽用病毒疫苗的影响对整个疫苗的纯化尤为关键。

本实验中将Giga P-DEAE对此兽用病毒疫苗进行纯化的效果与某商品化介质进行了比较。主要考察两种介质在同样层析条件下,对146S灭活病毒原料液的活性收率、纯化倍数、以及动态载量。

 


实验结果:


1.    离子交换介质对兽用疫苗收率的影响


介质

兽用疫苗收率(%)

总蛋白收率(%)

纯化倍数

Giga P-DEAE

  1. 80.7±10.5

  1. 14.9±3.0

  1. 5.4

某商品化介质

  1. 58.3±7.5

  1. 28.0±13.4

  1. 2.1


两种离子交换层析介质的纯化效率



  1. 2.    离子交换介质对兽用疫苗病毒原料液的载量

Giga P-DEAE, 某商品化介质对此兽用疫苗病毒原料液的动态载量进行测定,结果如下:


两种离子交换介质

对此兽用疫苗病毒原料液的动态载量


介质

动态载量

(mg原料液/mL介质)

Giga P-DEAE

  1. 5.84

某商品化介质

  1. 1.36


* 以穿透中146S的浓度占原料液中146S浓度的10%时的上样量为该介质的动态载量。




Giga P-DEAE介质相比某商品化介质,无论是在此兽用疫苗的抗原收率、纯构倍数、以及载量上都有显著提高。



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