电泳实验的危害与防护注意事项

2023-05-10 14:56:27

1.DNA电泳与溴化乙锭

“DNA的琼脂糖凝胶电泳是生物化学实验的基础型实验。质粒DNA的分离、纯化和鉴定在很多学校也是必开的综合性实验。这些涉及到DNA的提纯及鉴定的实验都会用到高度灵敏的荧光染色剂溴化乙锭对DNA进行染色。EB是强诱变剂,具有高致癌性,会在6070 cc蒸发,所以在学生实验中要特别注意其安全使用,严禁随便丢弃。在实验中使用及实验结束后处理应注意以下事项。

(1)使用中注意事项

 实验室涉及到EB的操作应统一固定在实验室的某一角落,称量固体时要带面罩和手套,使用含有EB的溶液务必带上手套。同时不要在胶太热的时候加EB,以防止因蒸发被吸入。接触到EB的玻璃器皿应集中放置并专门使用,污染到EB的枪头、抹布、手套及EB染色跑完的胶,回收至棕色的玻璃瓶中,定期进行焚烧处理旧。桌面或物体表面污染到EB时,可用活性碳进行处理。

2)EB溶液处理
AEB浓溶液(浓度大于0.5mg/mI)的净化处理
先将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5 mg/mI,加人1倍体积的5%次高锰酸钾,小心混匀后再加1倍体积的2.5 moL/L盐酸。小心混匀,于室温放置数小时;加入l倍体积的2.5 mol/L氢氧化钠,小心混匀后可丢弃该溶液,统一处理。

 BEB稀溶液(浓度小于0.5mg/mI)的净化处理

1 mg/mL的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置1 h;用滤纸过滤溶液,丢弃滤液并将活性碳与滤纸密封后丢弃,统一处理。

2. 聚丙烯酰胺凝胶电泳与有毒、有害物质

聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物化学实验中是常用的实验手段,涉及到蛋白质分离纯化及鉴定、蛋白质分子量及等电点测定的实验都会使用到该电泳方法,如聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质“SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测定蛋白质等电点等基础实验。在聚丙烯酰胺凝胶制备过程中用到以下有毒、有害物质:

(1)丙烯酰胺

丙烯酰胺具有很强的神经毒性,同时还有生殖、发育毒性。神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化。实验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物。丙烯酰胺可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体,且累积毒性,不容易排毒。因此,称量固体丙烯酰胺粉末和处理它们的溶液时必须戴手套和口罩。当丙烯酰胺聚合为聚丙烯酰胺凝胶时则为无毒的,但操作时仍要小心,凝胶内可能有少量未聚合的丙烯酰胺。

2)甲叉双丙烯酰胺

甲叉双丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝胶的交联剂,因有取代基丙烯酰胺,因此具有一定的毒性,能轻微刺激眼睛、皮肤和粘膜。称量固体粉末和处理它们的溶液时需戴手套和口罩,应避免与人体长时间直接接触,误碰触时应用清水洗净。

3TEMED

 TEMED是形成凝胶反应所用的加速剂,也具有强神经毒性,应防止误吸,操作时快速,存放时密封。

4)过硫酸铵

过硫酸铵是丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺进行化学聚合的引发剂,对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸人可致命。操作时需戴合适的手套、安全眼镜和面罩,始终在通风橱里操作,操作完后彻底洗手。

5)十二烷基硫酸钠(SDS)

 SDS是种阴离子表面活性剂,与蛋白形成复合物,用于测定蛋白质分子量。SDS有毒,是一种刺激物,能对眼睛造成严重损伤,可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。称量及配溶液时不要吸人其粉末,需戴合适的手套、面罩和护目镜。

6)巯基乙醇

它在测定蛋白质分子量时用于处理样品,吸入、摄人或经皮肤吸收后会中毒。其中毒表现有紫绀、呕吐、震颤、头痛、惊厥、昏迷,甚至死亡;对眼、皮肤有强烈刺激性;对环境有危害;对水体可造成污染。应在通风橱里操作,佩戴面罩,戴乳胶手套。

3.  RNA提取与有毒、有害溶剂

动物肝脏RNA的制备和纯度测定是生物化学实验课中必开的基础实验,RNA的提取过程需要用到溶剂去除蛋白质,这些溶剂对人体具有一定的毒性。

(1)氯仿

它对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用,是一种致癌剂,可损害肝和肾。它也易挥发,应避免吸入挥发的气体;操作时需戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。

(2)异戊醇

它被吸人、口服或经皮肤吸收有麻醉作用。其蒸气或雾对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有刺激作用,可引起神经系统功能紊乱,长时间接触有麻醉作用。操作时应戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。

3)含水酚液

 它含有苯酚,对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用,可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。吸人高浓度苯酚蒸气可致头痛、头晕、乏力、视物模糊、肺水肿等疾病。其慢性中毒可引起头痛、头晕、咳嗽、恶心、呕吐。称量苯酚时应佩戴防尘口罩,操作溶液时戴合适的手套和安全眼镜,并始终在化学通风橱里进行。它一旦接触皮肤,立即用大量流动清水冲洗,至少15 min。实验结束后产生的含酚废液可加入次氯酸钠或漂白粉煮一下,使酚分解为二氧化碳和水,再进行排放。

有机溶剂及实验废液等实验完成后应倒人盛放废液的容器中,然后统一回收,集中处理。

 4. 其它有毒、有害物质

氨基酸的分离与鉴定也是生物化学中必开的基础实验,茚三酮是氨基酸的显色剂,一般是配成溶液在喷雾器中喷雾使用。茚三酮经消化道摄入和吸人都有害,对眼、呼吸系统和皮肤有刺激作用;皮肤反复接触能引起皮肤过敏。使用中应避免吸入雾滴或蒸气;避免与眼接触;使用橡胶或塑料手套、面罩以及护目镜。

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