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“CRKP的产生可能与外膜孔蛋白的缺失有关”

SIFIC感染官微 2018-12-05 16:42:54

检索:周玲米

译者:彭威军

审核:周玲米 徐娅娟

编者按  

2018年发表在Microbial Drug Resistance上的一项研究发现:发生在突尼斯一家医院的19株产NDM-1的肺炎克雷伯菌暴发,分别由两个属于ST147和ST307的克隆引起; 其中外膜孔蛋白缺失在碳青霉烯耐药中可能发挥重要作用


突尼斯产NDM-1肺炎克雷伯氏菌暴发

与OmpK35和OmpK36 孔蛋白缺失有关


目的

对突尼斯Charles Nicolle医院发生的由产金属酶-β-内酰胺酶(MBLs)肺炎克雷伯菌引起的暴发的临床和分子特征进行描述,并对外膜孔蛋白(OMP)缺失对碳青霉烯耐药水平的影响进行分析。


方法

2010年至2015年间,共分离出178株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。以亚胺培南和乙二胺四乙酸(EDTA)作为抑制剂,采用组合纸片扩散法来进行产MBL筛选。通过聚合酶链式反应(PCR)和测序来鉴定耐药基因和毒力因子。基因分型通过脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型进行。通过PCR图谱来确定碳青霉烯酶基因的遗传环境。进行接合传播试验,并通过基于PCR的复制子分型将质粒分组。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析OMPs,并对孔蛋白基因进行测序。


结果

从四个不同病房住院患者身上共分离出19个有MBL活性的肺炎克雷伯菌(占10.6%)。NDM-1是唯一确定的与blaOXA-48相关的MBL。所有菌株至少缺少一种OMP,并且在缺乏OmpK35和OmpK36的菌株中碳青霉烯耐药水平显著升高。blaNDM-1位于IncFIA型接合质粒中,在所有菌株中具有相同的遗传背景。blaNDM-1的流行病学扩散归因于两个克隆,一个主要克隆属于 ST147(n = 16),另一个克隆则属于ST307(n = 3)。


结论

本研究描述了一起发生在突尼斯一家医院的由产NDM-1的肺炎克雷伯菌引起的暴发,分别由两个属于ST147和ST307的克隆引起,并强调OMP缺失在其中的作用,结合β-内酰胺酶的表达,赋予了高水平的碳青霉烯耐药性。


表3 19株产NDM-1的肺炎克雷伯杆菌的表型分析、抗生素耐药模式以及基因型特征

COL:粘菌素;EDTA:依地酸;ETP:厄他培南;EUCAST:欧洲抗生素敏感性试验委员会;MER:美罗培南;MIC:最小抑菌浓度;MLST:多位点序列分型;OMP:外模孔蛋白;PFGE:脉冲电场凝胶电泳;SDS-PAGE:十二烷基磺酰亚硫酸钠凝胶电泳;ST:序列类型。


表4 三种选中的产NDM-1的分离株及其转化结合子的表型和基因型特征

CHL:氯霉素;MNO:二甲胺四环素;NAL:萘啶酸;NET:奈替米星;OFX:氧氟沙星;SXT:复方新诺明;Tc:转化结合子;TET:四环素;TOB:妥布霉素。


图1:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳来分析产NDM-1的肺炎克雷伯氏菌菌株的OMP。M:分子大小标记物(以千道尔顿计);NG:既不产生Ompk5也不产生OmpK36的阴性对照;PC:同时产生OmpK35和OmpK36的阳性对照。


参考文献:Hamzaoui, Z., et al., An Outbreak of NDM-1-Producing Klebsiella pneumoniae, Associated with OmpK35 and OmpK36 Porin Loss in Tunisia. MICROBIAL DRUG RESISTANCE, 2018. 00(00): p. 1-11.

图文编辑:小小