检索：周玲米
译者：彭威军
审核：周玲米 徐娅娟
2018年发表在Microbial Drug Resistance上的一项研究发现：发生在突尼斯一家医院的19株产NDM-1的肺炎克雷伯菌暴发，分别由两个属于ST147和ST307的克隆引起; 其中外膜孔蛋白缺失在碳青霉烯耐药中可能发挥重要作用。
突尼斯产NDM-1肺炎克雷伯氏菌暴发
与OmpK35和OmpK36 孔蛋白缺失有关
对突尼斯Charles Nicolle医院发生的由产金属酶-β-内酰胺酶（MBLs）肺炎克雷伯菌引起的暴发的临床和分子特征进行描述，并对外膜孔蛋白（OMP）缺失对碳青霉烯耐药水平的影响进行分析。
2010年至2015年间，共分离出178株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。以亚胺培南和乙二胺四乙酸（EDTA）作为抑制剂，采用组合纸片扩散法来进行产MBL筛选。通过聚合酶链式反应（PCR）和测序来鉴定耐药基因和毒力因子。基因分型通过脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型进行。通过PCR图谱来确定碳青霉烯酶基因的遗传环境。进行接合传播试验，并通过基于PCR的复制子分型将质粒分组。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析OMPs，并对孔蛋白基因进行测序。
从四个不同病房住院患者身上共分离出19个有MBL活性的肺炎克雷伯菌（占10.6％）。NDM-1是唯一确定的与blaOXA-48相关的MBL。所有菌株至少缺少一种OMP，并且在缺乏OmpK35和OmpK36的菌株中碳青霉烯耐药水平显著升高。blaNDM-1位于IncFIA型接合质粒中，在所有菌株中具有相同的遗传背景。blaNDM-1的流行病学扩散归因于两个克隆，一个主要克隆属于 ST147（n = 16），另一个克隆则属于ST307（n = 3）。
本研究描述了一起发生在突尼斯一家医院的由产NDM-1的肺炎克雷伯菌引起的暴发，分别由两个属于ST147和ST307的克隆引起，并强调OMP缺失在其中的作用，结合β-内酰胺酶的表达，赋予了高水平的碳青霉烯耐药性。
表3 19株产NDM-1的肺炎克雷伯杆菌的表型分析、抗生素耐药模式以及基因型特征
COL：粘菌素；EDTA：依地酸；ETP：厄他培南；EUCAST：欧洲抗生素敏感性试验委员会；MER：美罗培南；MIC：最小抑菌浓度；MLST：多位点序列分型；OMP：外模孔蛋白；PFGE：脉冲电场凝胶电泳；SDS-PAGE:十二烷基磺酰亚硫酸钠凝胶电泳;ST：序列类型。
表4 三种选中的产NDM-1的分离株及其转化结合子的表型和基因型特征
CHL:氯霉素；MNO：二甲胺四环素；NAL:萘啶酸；NET：奈替米星；OFX:氧氟沙星；SXT：复方新诺明；Tc：转化结合子；TET：四环素；TOB：妥布霉素。
图1：采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳来分析产NDM-1的肺炎克雷伯氏菌菌株的OMP。M：分子大小标记物（以千道尔顿计）；NG：既不产生Ompk5也不产生OmpK36的阴性对照；PC：同时产生OmpK35和OmpK36的阳性对照。
参考文献：Hamzaoui, Z., et al., An Outbreak of NDM-1-Producing Klebsiella pneumoniae, Associated with OmpK35 and OmpK36 Porin Loss in Tunisia. MICROBIAL DRUG RESISTANCE, 2018. 00(00): p. 1-11.
图文编辑：小小