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糖化血红蛋白检测过程中的影响因素

Sysmex学术应用部资料分享交流 2020-02-13 09:06:54

在HLC-723G8 的日常使用中,常会有一些因素导致HbA1c测定结果不可靠或者根本无法测出。本文就影响HLC-723G8测定HbA1C 的常见干扰因素进行分析探讨。

1 变异血红蛋白

      地中海贫血是一组遗传性溶血性贫血疾病,它是由于基因缺陷导致血红蛋白α 链或者β 链存在突变或者缺失[1],血红蛋白各成分表面的电荷量产生继发性改变,从而使离子交换色谱分离时间提前或者延迟,此时HbA1C常不能单独形成分离峰,因此其检测结果为0.0%。

2 尿毒症患者标本

      尿毒症患者由于肾功能严重受损常继发肾性贫血,患者体内有过多的尿素(BUN)等含氮代谢废物及毒物在体内蓄积, 尿素在体内可自发地分离形成氨和氰酸盐, 氰酸盐经质子化作用后形成异氰酸, 血红蛋白链端的缬氨酸可与异氰酸发生特异性的结合反应,形成稳定的氨基甲酰血红蛋白,氨基甲酰血红蛋白与HbA1C一样在溶液中都带较强正电荷,所以在采用基于电荷分离原理的分析方法中(如电泳、离子交换层析法),HbA1C测定结果易受氨基甲酰血红蛋白的影响,导致HbA1C结果偏高[2]

3 高乙醇标本

      离子交换HPLC 法测定HbA1C是通过计算HbA1C占总血红蛋白的比值,随着乙醇浓度的增加氧合血红蛋白的含量增加,HbA1C所占的比例逐渐变少,所以不能真正反映个体HbA1C的水平,导致测定结果的不准确[3]

4 严重脂浊标本

      各种脂蛋白因所带电荷的不同,在用离子HPLC 法检测时也会对其进行分离,所以当严重脂浊标本各种脂蛋白含量达到一定值时(浊度大于2500 Formazin), 在离子HPLC 法测定HbA1C时含量不同的脂蛋白也会同时进行分离并在图谱相应位置叠加,影响电泳图谱中血红蛋白各成分的含量,从而对HbA1C测定结果产生不定向干扰[4]

5 透析患者的样本和贫血患者的样本

      正常人群测定值的TOTAL AREA的范围大概是500-2700。推荐用可靠性更高测定值的TOTAL AREA的范围为700-2500。如果因为贫血TOTAL AREA小于700以下测定结果为不可靠,应进行红细胞浓缩或进行100倍(原血上机为200倍)用样本杯进行检测[5]



       HLC-723G8 全自动糖化血红蛋白分析仪具有精密度高、相关性好、携带污染小、测试速度快、操作简便等优点而被广泛使用于临床,但由于其采用离子交换HPLC 法,凡是影响该方法的因素均会对仪器产生一定的影响, 实际使用中不能完全排除特殊标本对检测结果的影响, 只有充分了解仪器性能、总结分析影响其测定结果的各种样本干扰因素,才能获得可靠的分析结果。


参考文献

[1]秦文斌,血红蛋白病[M].北京:人民卫生出版社,1984:39.

[2]康建华,杨立顺,袁海生.变异血红蛋白和氨基甲酰血红蛋白对糖化血红蛋白测定干扰的评定[J].检验医学,2012,27(6):482-485.

[3]张艳芳,袁春雷,谢丰华,等.2 例遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症患者糖化血红蛋白测定的分析[J].国际检验医学杂志,2011,32(2):288-289.

[4]张静,王永宾.糖化血红蛋白检测的影响因素及临床意义[J].中外医疗,2014,33(25):191-192.

[5]东曹(上海)生物科技有限公司的《HLC-723G8 使用说明书》