大名鼎鼎的JBC杂志(The Journal of Biological Chemistry)在其官方网站关于Western Blot总蛋白均一化的投稿要求中,推荐使用总蛋白进行均一化并直接链接到LI-COR 公司官方网站关于REVERT Total Protein Stain的介绍,足见LI-COR 产品的权威和被认可程度。
JBC官网推荐
REVERT Total Protein Stain总蛋白均一化方案
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REVERT Total Protein Stain总蛋白均一化结果展示
为什么JBC会推荐
REVERT Total Protein Stain
总蛋白均一化方案?
1. LI-COR Biosciences公司作为近红外荧光成像的创始者和领导者,在近红外荧光领域已有25年的丰富经验,是名副其实的近红外专家;
2. 相对于看家蛋白均一化而言,REVERT Total Protein Stain 总蛋白均一化不再受生物学差异的影响,不需要在每一种生物学条件下验证看家蛋白是否稳定表达;
3. 与蛋白质可逆结合,不影响后续Western Blot实验中蛋白和抗体的结合;
4.在近红外荧光波段成像,灵敏度更高,背景更低;
5.能校正Western Blot的所有步骤
其实已经有越来越多的高分文献中使用了REVERT Total Protein Stain 总蛋白进行均一化。例如在2017年5月Jianguo Huang等发表在Nature communication文章中1,在Western Blot实验中,采用LI-COR REVERT™ Total Protein Stain对Nf1和Trp53进行总蛋白均一化并证实了Nf1和Trp53的敲除,并且使用LI-COR Odyssey 双色红外激光成像系统进行近红外荧光Western Blot成像。详见下图所示:
Western Blot及REVERT总蛋白均一化结果
REVERT 总蛋白染色结果
LI-COR REVERT Total Protein Stain
如何实现总蛋白均一化?
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Referrence:
1. Jianguo Huang,et al.Generation and comparison of CRISPR-Cas9 and Cre-mediated genetically engineered mouse models of sarcomaNat Commun. 2017; 8: 15999.
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