疏水层析
疏水层析是依据蛋白质疏水性差异分离的。即根据蛋白质和疏水介质表面的疏水基团的可逆相互作用进行分离。蛋白的疏水性在高离子强度下被增强,因此在高离子强度环境中结合,通常采用降低离子强度的方式进行洗脱。独特的吸附分离模式使得疏水层析成为硫酸铵盐析后或离子交换高盐洗脱后理想的纯化方式。
疏水层析
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疏水层析介质
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疏水层析应用注意事项
●不同配基及配基浓度介质疏水作用力不同。
●不同蛋白疏水层析时,或者使用不同疏水层析介质纯化,缓冲液中盐浓度不一样。
●温度和pH对蛋白疏水性影响较大,疏水层析过程中pH和温度要恒定。
疏水层析选择指南
疏水层析的应用
1)适合含有芳香基团的大分子的分离纯化。
2)盐析后的样品无需脱盐即可进行疏水层析。
3)在疫苗纯化方面应用较多,比如乙肝疫苗常用Butyl Focurose 4B/4FF分离纯化。
4)可完全取带传统的盐析沉淀工艺,以保持生物分子的生物活性。
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