不容错过的外泌体(Exosome)研究方法

2023-05-10 14:56:27

外泌体是由多种类型的细胞(如T细胞、B细胞、树突状细胞、血小板、神经元细胞和上皮细胞)分泌的一种囊泡状结构。它参与多种生物学过程,包括免疫监控、血液凝固、神经传递、干细胞维护和组织修复等。

调查发现,在分离exosome时,约有56%的人采用超速离心法,该方法:

    • 耗时耗力:需8-30个小时

    • 处理样本少:每次最多处理6个样品

    • 需要大量的起始材料

    • 产量不高

另外,由于外泌体体积小,检测也是一大难题。

总之,外泌体的纯化和检测都给这一领域的研究带来了不小的技术局限性

为解决上述难题,美天旎研发了Exosome Isolation Kit,与传统分离外泌体的方法(超速离心)相比,磁珠分选有着明显的技术优势:

  • 操作简单,省时力(无需超速离心)

  • 样本最小体积可低至0.5 mL

  • 可同时快速筛选并检测外泌体表面蛋白

目前有39种连接不同类型抗体的外泌体捕获微球,利用流式细胞术可以检测37种不同类型的外泌体和2种同型对照。像人血浆、细胞培养上清中或者尿液、腹水中的外泌体,我们建议使用Exosome Isolation Kit CD9, human, Exosome Isolation Kit CD63, human,或者 Exosome Isolation Kit CD81,先进行预富集,然后再进行后续的检测。


简单五步,完成外泌体的纯化和分析(以血浆为例):
  1. 将全血进行离心处理,收集血浆;

  2. 用Exosome Isolation MicroBeads CD9, human, Exosome Isolation MicroBeads CD63, human, 或 Exosome Isolation MicroBeads CD81, human与血浆共孵育1小时;

  3. 将磁性包被的产物加到放置于μMACS分离器的μMACS分选柱中;

  4. 未结合磁珠的血浆成分顺利流出分选柱;

  5. 将μMACS分选柱移出磁场,洗脱即可得到纯化的外泌体。

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注:内含磁珠试剂、分选柱及分选buffer


式检测原理示意图

外泌体流式分析产品:MACSPlex Exosome Kit, human (# 130-108-813)。


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