咖啡致癌?呵呵,我跑一块SDS-PAGE胶抵你喝一辈子咖啡!

2023-05-10 14:56:27


昨天晚上果壳的一篇文章,

关于“星巴克咖啡致癌”,

把小汪炸了出来!

这年头,气功保健、中医养生,

只要涉及致癌大家都很关心!

然而看到具体内容,小汪也就淡定了。

避开剂量谈毒性

都是

如果星巴克都需要标注<ProPosition 65>

那么

请在生化领域的每一本书上都标上<ProPosition 65>

对!

是每一本!

而且字体要放大10倍的那种!

作为一个杠精,

小汪必须算算,

SDS-PAGE里的丙烯酰胺到底有多少?


SDS-PAGE

是Ulrich K. Laemmli教授开发的一种不连续的电泳系统,用于分离分子量介于5和250 KDa之间的蛋白质,这位老哥1970年的文章(doi:10.1038/227680a0),至今为止被引用189286次。



以10%的SDS-PAGE为例,其分离胶和浓缩胶的配方分别如下:


10%胶

DDW

30%丙烯酰胺

1.5M Tris-HCl, pH8.8

10%SDS

10%AP

TEMED

5mL

1.3mL

1.7mL

1.9mL

0.05mL

0.05mL

0.007mL

5%胶

DDW

30%丙烯酰胺

1.5M Tris-HCl, pH8.8

10%SDS

10%AP

TEMED

2mL

1.4mL

0.33mL

0.25mL

0.02mL

0.02mL

0.02mL



首先,咱们必须要好好理一理污染的途径:


1、做胶过程:

需要30%丙烯酰胺2.03mL,即丙烯酰胺粉末0.609g。假设在配制的过程中仅有千分之一的丙烯酰胺未聚合;而未聚合的丙烯酰胺中,如果接触了百分之一,那么小汪此刻接触的剂量应该是0.006mg,看上去还蛮安全的。


2、接触过程:

然而由于丙烯酰胺水溶性强,经皮吸收量可为消化道的200倍左右,如果配置过程中,不小心接触到了没有清洗的管子,假设离心管的外壁持续被30%丙烯酰胺污染,大概只需要0.1mL的溶液,再假设小汪仅用手捏着管子,仅接触了1/3的面积,那么一次触摸,大概就接触了10mg!!!


3、配制过程:

如果在配制过程中,一滴10uL的30%丙烯酰胺直接滴到手上,那么大概接触了3ug的丙烯酰胺,除非超级不走心,直接把几百uL直接吹在手上,不然也挺安全的。


如此看来,最大的可能性就是接触污染了!


作为一只生物狗,一定要提醒大家:

一定要戴手套

一定要戴手套

一定要戴手套

接触过丙烯酰胺的耗材立刻扔掉

接触过丙烯酰胺的耗材立刻扔掉

接触过丙烯酰胺的耗材立刻

扔掉!


有些实验室,千万的经费、几百万的设备,

却舍不得多买点耗材,

配胶的手套反复用,

配胶的管子永远不扔。

(甚至某些师兄师姐满实验室抓戴手套的……)

小汪只能说:

各位,这不是省钱,这是要命啊!?





什么!?电泳没有条带?

看来你没有关注生物匠!

或者平时没有仔细像翻书一样翻看生物匠!

因为之前都推送过

SDS凝胶电泳的注意点哦!

最后祝大家实验顺利吧

附实验技能两篇:

SDS凝胶电泳样品制备中不易发现而又重要的几点

SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白实验+一本好书《灿烂千阳》





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