酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）又名陈干酪酵素、多酚氧化酶、儿茶酚氧化酶等，是一种含铜氧化还原酶，广泛存在于动植物、微生物和哺乳动物中，是多巴和黑色素合成的关键酶，TYR是二价铜离子与酶蛋白相互结合的金属酶，兼有氧化和加氧酶两种功能，其双重功能可增强生物体表面机械强度，并在外来物入侵时获得免疫反应过程中有重要意义。
TYR对底物（羧酸及其衍生物、苯胺及其衍生物、酚类及其衍生物及其他非酚类等）都具有较强的催化降解能力，近年来，TYR被广泛用于食品加工、医学、美容、生物传感器、环境保护、染料脱色等方面的研究。因此，对获得低成本、来源广泛的TYR及其相关性质的研究具有重要的经济和理论意义。
目前，TYR的制备主要来源于真菌，细菌等，而从植物中提取制备TYR的报道较少，云南莴笋尖具有耐热、耐寒适应性强、抗病虫害等优点，相比以微生物为实验材料来源，云南莴笋尖具有取材便捷、实验周期短等优势，从而提高其经济价值。来自西南大学生命科学学院的廖海君、李蕊伽、陶敏等人，以廉价易得的云南莴笋尖为实验材料对TYR进行分离纯化并研究其部分酶学性质，旨在为TYR的来源提供新途径，为其应用提供参考。
本实验以云南莴笋尖为材料分离纯化的TYR的酶学性质、金属离子及化合物等对该酶的作用与其他报道不尽相同。经分离纯化后的TYR，其回收率为9.56%，低于蕹菜叶（11.33%），和海洋放线菌（9.9%）相近，高于米曲霉（0.7%）。云南莴笋尖中的色素在波长475 nm处也有吸光度，在计算蛋白质的量时，使数值增大，从而使TYR纯化倍数、回收率偏低，进而对TYR的纯化过程造成影响。因此，如何有效去除色素是以绿色植物叶为材料提取TYR的亟待解决的问题。
该TYR的最适反应温度和最适反应pH值分别为60℃，8.0，高于黑木耳（40 ℃，pH 7.0）、双孢蘑菇（30 ℃，pH 6.5）、南美对虾（40 ℃，pH 6.0）、蕹菜叶（45 ℃，pH 7.5）。其中，最适pH值与海洋放线菌（pH 8.0）相同。
云南莴笋尖TYR亚基分子量为65.23 kD，高于香樟果实（43 KD），低于曲霉菌（140 kD），与人体（60.40 kD）相近。物种的生存环境、长期分离进化及种属差异等原因可能导致TYR分子质量不同。
实验中的13 种金属离子对该TYR活力有不同程度的影响，其中Co2＋、Mn2＋、Pb2＋、Ag＋、Cd2＋、Ba2＋、Ca2＋对该酶均有激活作用，且Co2＋、Mn2＋随着离子浓度的增大，其对该酶的激活作用越明显，可能是因为参与该TYR酶原的激活过程或促进该酶活性中心与底物的亲和力。低浓度的Zn2＋和Cu2＋表现为激活作用，高浓度表现为抑制作用，K＋、Mg2＋、Li＋对该酶活性影响不明显。不同金属离子对该TYR活力存在的不同影响，其具体作用机制尚待进一步研究。
酪氨酸酶的抑制特征为可逆抑制，由于分子多样性，其抑制机理复杂，一种抑制剂可能同时具有几种抑制机理；同种抑制剂在不同底物作用下，其抑制机理也不同。本实验中，抗坏血酸和EDTA为TYR的抑制剂，前者在浓度为25 mmol/L时对该酶的活性表现为完全抑制，而EDTA对该酶活性的抑制作用不明显。尿素对该酶活性无影响，草酸在浓度为10 mmol/L时对该酶活性完全抑制，表明草酸是TYR的一种抑制剂。4 种有机溶剂中乙醇、异丙醇、正丁醇均对该酶有抑制作用，其可能是有机溶剂破坏TYR的表面的水化层，降低环境中的极性，破坏维持酶结构的二级键，使酶构象发生改变。
目前，TYR的研究主要集中在医药、化妆品领域及食品应用领域，本实验从云南莴笋尖中分离纯化的TYR，为其在理化性质，食品加工储存及其他方面的应用提供更多的参考。
内容来源于《食品科学》2017年8期文章《云南莴笋尖酪氨酸酶分离纯化及酶学性质》。作者：廖海君，李蕊伽，陶敏，白亚娟，唐菁，唐云明。请点击下方阅读原文即可查看文章详细内容。
编辑：吴 楠
责编：张睿梅
为了帮助食品及生物学科科技人员掌握英文科技论文的撰写技巧、提高SCI期刊收录的命中率，综合提升我国食品及生物学科科技人员的高质量科技论文写作能力。在《Journalof Agricultural and FoodChemistry》、《FoodChemistry》、《Journalof FoodScience》、《Foodand Bioprocess Technology》、《JournalofFunctional Foods》杂志等SCI期刊主编及在《Nature》等期刊发表大量高水平学术论文的专家支持下，《食品科学》编辑部将于2017年8月14－15日在长春举办“第七届食品与生物学科高水平SCI论文撰写与投稿技巧研修班”，为期两天。欢迎您参加此次培训班。
长按或微信扫码报名
Copyright © 2023 All Rights Reserved 版权所有 福建水产设备联盟