酶活性检测服务

2023-05-10 14:56:27

蛋白酶制剂检测/酶活性分析测定

酶制剂检测原理

 酶制剂检测应用酶对底物专一性的特点,采用高纯度底物,专一检测某种酶制剂对底物的降解,然后测定产物含量(分光光度计)。  

标准曲线:通过用其高纯度的产物制作标准曲线,通过分光光度计的读数查出对应的产物含量,然后计算酶活。  

酶制剂是指从生物中提取的具有酶特性的一类物质,主要作用是催化食品加工过程中各种化学反应,改进食品加工方法。中国已批准的有木瓜蛋白酶、α—淀粉酶制剂、精制果胶酶、β—葡萄糖酶等6种。酶制剂来源于生物,一般地说较为安全,可按生产需要适量使用。检测酶制剂产品质量常用的指标一般是酶活性,但也不是唯一的指标。

 优兰达生物提供酶制剂方面的检测:包括酶活、常规指标(水分、粒度等)、卫生指标(菌落总数、大肠杆菌、沙门氏菌等)。

可检测的酶制剂产品

优兰达生物专业提供各种酶制剂的检测服务:脂肪酶、木聚糖酶、歧化酶、纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、尿素酶、糖化酶、植酸酶、淀粉酶、果胶酶、木瓜蛋白酶、α—淀粉酶制剂、精制果胶酶、糖化酶、脂肪酶、角蛋白酶等。

  蛋白质活性检测 

常规的蛋白质质量分析手段包括SDS-PAGE蛋白质电泳分析、内毒素检测与控制、酶活性检测(终点法及动力学曲线)、基于细胞的蛋白质活性分析等。

酶活性检测服务特点

 更短的检测周期-帮助客户快速获取精准检测结果 

 更低的检测费用-合理的收费体系降低客户测试服务成本 

 更完善的检测方案-为客户提供检测分析一站式服务 

 更优质的售后服务-帮助客户解决服务后期技术疑问

常见的酶活性测定方法 

通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手段来进行评价,它可以用来筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量等,酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用最为广泛的一种方法。其操作相对简单,检测所用时间短,便于生产实践应用。酶活测定结果虽不能完全反映酶的使用效果,但通过检测至少可以避免使用劣质的酶制剂。目前测定酶制剂活性的方法主要有:

1、比色法 

 比色法是以反应生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法,根据原理不同可分为还原糖法和色原底物法。

 2、黏度法 

 这种方法是根据酶能够降低一定浓度的标准底物(控制pH值、温度等条件)的黏度的能力来确定酶的活性。利用的底物主要有化学合成的底物和自然提取的底物。测定的酶的活性值是通过与同时测定的标准酶活性的比较,来确定酶的活性。该法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活测定。这种方法的特点是通过降低底物的粘度来反映酶的活性,这也正是酶在体内起作用的重要特征。该法虽然灵敏度较高,但重现性差,操作复杂费时,应用难于普及 

3、免疫学法

用于酶活性分析的免疫学法包括ELISA法和免疫凝胶扩散法。这两种方法是根据酶与抗体之间发生反应,然后ELISA法通过第二步反应,凝胶扩散法则通过印染过程来确定酶的活性。 这些方法非常灵敏,能够检测到极低水平的酶蛋白。但它们的缺点是对于每个产品的酶需要特殊的抗体,另外抗体能够与非酶蛋白质发生反应。由于抗体本身所用的蛋白质是特定的,因此,由不同生产者生产的同种类型的酶之间是没有交叉性的。另外,采用实验动物的敏感性也值得探讨。

4、凝胶扩散法 

这种方法是将酶作用的底物与某种凝胶混合后倒入培养皿中,凝固之后,在凝胶上切开一条凿,倒入标准酶液和测试酶液。培养一定时间后,在切开的凝胶周围能够看到水解区域,区域的大小与酶的含量成正比。在某些情况下,还可以再加入其他试剂来显示水解的区域。如木聚糖酶活力的测定。 这种方法虽然简单,但培养时间长。因为这种方法是根据区域的大小来确定酶的活性,所以其准确性要低于其他非扩散的方法。 

5、比浊法

 以酵母或酵母细胞壁在缓冲溶液中的浊度或吸光度的降低来表示酶活力,如β-葡聚糖酶活力的测定。

 6、体外模拟消化技术

酶活测定毕竟不能反映外源酶在机体内真实的作用效果,因此,对于体外法评定饲料营养价值的研究不断增加。体外法评定饲料营养价值是通过模拟消化道内温度、pH、消化酶分泌、胃肠运动和养分吸收等参数,在体外建立一套与畜禽消化道内环境接近的操作程序,对饲料及酶制剂进行营养价值预测和评定。常用的体外模拟消化技术包括:①胃蛋白酶—胰酶法;②胃蛋白酶—小肠液法;③胃蛋白酶—胰酶—瘤胃液法;④胃蛋白酶—胰酶—碳水化合物酶法。

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