作为一种疾病诊断的非侵入性的方法，尿液样本的分析是不可替代的。然而在尿样中，非降解蛋白质和RNA仅可以在尿的细胞外囊泡（uEVs）内找到。近年来，使用少量尿和不复杂的设备来富集uEVs的各种方法已被开发并取得了成功。
来自CIC bioGUNE的科学家对其中4种差分超速离心方法进行了比较。这4种方法分别是：基于凝集素的外源纯化；Exoquick（System Biosciences）；Invitrogen的外泌体纯化；利用NORGEN百特公司的外泌体RNA试剂盒的内部改进的方法。对胞外囊泡里选定的基因和蛋白marker的分析结果表明，每种方法都能分离出不同的uEV蛋白标志混合物。在各自的条件下，NORGEN试剂盒在基因转录物和蛋白的检测和重复性方面最好。通过使用该方法，他们能够从前列腺癌腺瘤患者的尿样检测出不同的uEV蛋白质标志物。这些结果表明，利用小体积尿液和避免超速离心是可以分离uEV的，这也使临床分析变得更简便。然而，我们在浓缩方法的选择上应该谨慎，因为各个方法对不同亚群的uEVs蛋白标记物有不同的亲和度。
图：5种分离尿液EV方法的比较。10位健康个体的尿液两个10毫升一组，并用5个方法进行处理（这样共有100个样本被进行了处理）。在每种方法下所得到的最终沉淀物用100μl外泌体重悬缓冲液（ERB，Life Technologies公司）重悬，然后按70:20:10的比例进行RNA，蛋白质和EM分析。（具体内容可查阅本文参考文献）
参考文献：Different EV enrichment methods suitable for clinical settings yield different subpopulations of urinary extracellular vesicles from human samples. J Extracell Vesicles. 2016; 5:29497.
本文转自外泌体之家。
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