成功WB实验,从优化蛋白提取开始!

1

避免蛋白降解

使用蛋白酶/磷酸酶抑制剂减少裂解细胞/组织时蛋白被降解的风险。

2

提取更多可溶性蛋白

与RIPA（#20-188）相比，CytoBuster可溶性蛋白抽提试剂（#71009）能抽提更多的可溶性蛋白，增加低丰度蛋白的检测效率。

图1：提取MCF-7细胞蛋白中乳腺癌生物标志物蛋白，CytoBuster得率显高于RIPA。

3

使用核酸酶降低蛋白样品粘度提高产量

Benzonase核酸酶(#70664-3)可以降解所有形式的DNA和RNA(单链、双链、线形和环状)，迅速降低样品粘度, 增加蛋白产量。

图2：经Benzonase核酸酶处理蛋白样品粘度显著降低

4

去除白蛋白和IgG等高丰度蛋白

ProteoExtract高丰度蛋白去除试剂盒（#122643-1KIT）可以从体液（如血浆/血清/脑脊液等）中高效、特异性地除去白蛋白和IgG，从而显著降低样品的复杂性，增加低丰度蛋白的检测。

5

核蛋白和胞浆蛋白分离提取

核蛋白和胞浆蛋白分离抽提试剂盒（#71183）能有效分离提取核蛋白和胞浆蛋白，高文献引用率，操作方便(全部操作在一个小离心管中)，仅需30分钟完成。

6

膜蛋白及其复合物提取

细胞表面受体（主要是各种膜蛋白）一般难溶解于常规抽提试剂，种类复杂而又多为低丰度蛋白，因此提取研究膜性蛋白及其复合物是非常困难的。

ProteoExtract跨膜蛋白抽提试剂盒（#71772-3）能温和、高效地从哺乳动物细胞和组织中抽提跨膜蛋白（跨膜次数多达7-12次），特别适合GPCRs等信号通路受体蛋白及其复合物。

图3：膜蛋白及膜相关蛋白的标志性蛋白的免疫印迹——使用ProteoExtract跨膜蛋白抽提试剂盒。第3，6道为膜蛋白，第1，2，4，5为总蛋白或非膜蛋白。

7

细胞骨架蛋白提取

细胞骨架蛋白（包括肌动蛋白和大量相关蛋白）的变化涉及细胞内物质转运、细胞运动、增殖等重要功能，也是细胞周期调控和癌转移研究中的热点。

ProteoExtract细胞骨架富集及分离试剂盒（#17-10195）特异性、温和、高效抽提活性细胞骨架蛋白，有效消除其它成分干扰。

-

8

线粒体蛋白提取

ProteoExtract胞质/线粒体分离试剂盒（#QIA88)利用独特的抽提试剂从哺乳动物细胞中抽提得到两种不同的蛋白质组分：线粒体组分及胞质组分。操作简单易行，不需要超速离心的步骤。得到的蛋白组分可直接用于1D及2D凝胶电泳、免疫印迹、凋亡及信号转导相关的靶蛋白细胞内移位研究。

   

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