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样品：蚯蚓激酶粗品——新鲜蚯蚓置于20mM PBS pH7.2中匀浆后4度静置4小时，离心后的上清液（蚯蚓:PBS=1:2)
传统工艺：水提的上清液先硫酸氨盐析，在将盐析的样品溶解后脱盐，脱盐后在过离子交换层析。
注：图片摘自网络
新工艺流程：
捕获：水提的样品用汇研生物超高载量离子交换介质DEAE Focorose 6XL进行粗步纯化，在纯化的同时也进行有效浓缩，减少体积。
层析柱：汇研生物HK16/20(装填填料20ml)
填料：汇研生物超高载量离子交换填料DEAE Focurose 6XL
联系方式：W/Q:514099167，T:15771973009
平衡/清洗液：20mM PBS pH 7.2
洗脱液：(杂质峰）20mM PBS 100mM NaCl pH7.2
洗脱液：(目标物质）20mM PBS 300mM NaCl pH7.2
平衡：2ml/min 10CV
上样：1.5ml/min 20CV
清洗：2ml/min 20CV
洗杂：2ml/min 10CV
洗脱：2ml/min 5CV
中度纯化：捕获的洗脱峰过复合型离子交换层析继续纯化
层析柱：汇研生物HK16/20(装填填料20ml)
填料：汇研生物高刚性复合型离子交换层析填料 MMA Focurose 6HF
联系方式：W/Q:514099167，T:15771973009
平衡/清洗液：20mM PBS 300mM NaCl pH7.2
洗脱液：20mM PBS 500mM NaCl pH7.2
平衡：2ml/min 10CV
上样：1.5ml/min 20CV
清洗：2ml/min 20CV
洗脱：2ml/min 5CV
精细纯化：中度纯化的样品过凝胶过滤层析继续纯化
层析柱：汇研生物HK16/100(装填填料180ml)
填料：汇研生物凝胶过滤层析 Focurose 75pg(分离范围3000-70000D）
联系方式：W/Q:514099167，T:15771973009
平衡/清洗液：20mM PBS pH7.2
洗脱液：20mM PBS pH7.2
平衡：0.5ml/min 10CV
上样：0.2ml/min 15ml(MMA Focurose 6HF洗脱峰）
洗脱：0.2ml/min
结果：三步层析后活性回收率53.4%，比活141.18u/ml（远高于传统工艺）
更多信息联系汇研生物：027-8777 2229（www.huiyan-bio.com)
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