不同方法测定饲料粗蛋白质的比较

粗蛋白质的半微量检测法在滴定的时候，滴定管的液体流量完全靠人工控制，颜色的变化和液体的变化往往只在一瞬间，在滴定时即需要检测员对颜色变化有准确的判断，又需要检测员能眼疾手快的终止滴定，同时还要防止氨气跑掉，这对经验和身体反应速度有较高的要求。新手检测员身体反应速度快，但是往往经验不足；而经验丰富的检测员，随着年龄的增长，身体反应速度开始逐渐变慢；年富力强而又经验丰富的检测员的数量低于实际生产的需求，长期高负荷的进行样品的检测，又会造成工作疲劳，影响检测结果。全自动定氮仪采用的比色法判断液体颜色的变化，在液体颜色达到设定值的瞬间，通过电子原件的传导，终止滴定然后计数。因此从理论上，全自动定氮仪的检测精度更高，工作时间更长，更适合生产需求。

各组检测员空白样品的测定值均小于0.200 0 mL，说明各试验组空白样品均对试验结果无影响。但空白样品都由第三方实验员统一预处理的，而滴定结果从半微量定氮法到全自动定氮仪，呈现显著下降的趋势，而且样品的平行性也更好。使用滴定管进行样品滴定时，液体流速在30~50μL/s，而全自动定氮仪的滴定液的流速为3~5 μL/s。因此，全自动定氮仪在滴定空白样品时，检测精度显著高于人工检测。而在本试验两种不同型号的全自动定氮仪中，FOSS 2300已经使用10 年，在管路和电子原件均存在老化现象，而FOSS 8400的刚刚使用1年，经过磨合后正处于最佳状态，因此FOSS 8400的空白样耗酸量和标准误均要低于FOSS 2300，说明全自动定氮仪随着使用时间的增加精确度会逐渐下降，但其精密度依然高于依赖人工和玻璃器皿的半微量定氮法。

硫酸铵回收率的试验主要是检测蒸馏和滴定系统是否达到要求，其数值一般要求在99.50%~100.50%之间。从检测数据分析，半微量法中检测员A的检测结果为99.25%，并未达到系统要求。而半微量法中检测员B和两种不同型号的全自动定氮仪的硫酸铵回收率则均在99.50%以上，完全达到后续试验要求。在使用半微量法定氮时，无论是检测员A还是检测员B测定结果的标准误都高于全自动定氮仪的标准误。这可能与检测系统液体步进的差异有关，全自动定氮仪每次滴定时消耗的酸仅为半微量法的十分之一。因此，全自动定氮仪在进行样品检测时，平行性也要好于依赖玻璃器皿的半微量法。这说明以玻璃器皿为主的半微量法检测系统在精密度的控制上存在不足，而仪器的老化对粗蛋白的检测结果和平行性也存在影响。

半微量定氮法需将消化后的液体从消化管中转移到容量瓶中，再用移液管转移到蒸馏瓶中，蒸馏后再对样品进行滴定，整个过程对检测员的操作技能的要求比较高，而且反复的转移也难免会造成氮元素的损失。而且半微量法的蒸馏过程，整个管路并不属于全封闭状态，难免会造成氨气的损失；而滴定的过程也可能会因为检测员经验不足或操作失误而产生误差，造成样品测定结果偏低或平行性较差。蛋白饲料原料的粗蛋白检测结果看，半微量法中两名检测员对蛋白质饲料原料的测定结果总体上低于全自动定氮仪，这可能与蒸馏过程中氨气的损失有关，这也与硫酸铵回收率的测定结果比较一致。而且检测员A豆粕和水解羽毛粉的检测结果显著偏低，则主要是因为检测员A在这两个样品的蒸馏过程中有1~2个重复样存在密封不严的情况，造成了氨气的损失。检测A和检测员B均有一个样品测定结果显著偏高，其主要原因是因为，两名检测员在滴定过程中，个别样品存在滴定过量的情况。在实际生产中，如果样品数量过大，检测员进入疲劳期的时候，这种情况是很难避免的。而全自动定氮仪在蒸馏过程中，将消化管直接放入蒸馏装置进行蒸馏，因此减少了氨气的损失，其测定结果高于半微量定氮法。