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新品推荐:Protein A亲和层析介质

生物咖啡茶 2018-12-05 15:56:53


纳微科研人员经过多年的积累,利用自主知识产权研发出新一代Protein A 亲和层析介质Uni®Mab系列。该亲和层析介质专为大规模抗体纯化而设计,是由高纯度的Protein A与高机械强度PMMA微球偶联而成,能从血清、细胞培养上清液、腹水及细胞提取物中分离纯化多种不同类型的抗体或包含抗体Fc片段的基因重组蛋白。Uni®Mab系列亲和层析介质具有高机械强度、高耐碱性、高载量及高效率等特点, 是您规模抗体纯化工艺的首选!



1.高度的粒径均一性


Uni®Mab亲和层析介质具有高度的粒径均一性和精确的孔径结构,批次重现性好,装柱容易。  


2.高机械强度


Uni®Mab亲和层析介质以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球为基质,相比琼脂糖基质的层析介质,Uni®Mab的耐反压性能更高,能够承受0.5 MPa的压力;分离过程中流速更快,从而减少了分离纯化时间,提高了分离效率,可用于数百升的大型层析制备柱。下图为Uni®Mab与琼脂糖基质Protein A亲和介质耐压性对比。(测试条件:柱尺寸:4.6 mm × 50 mm;流动相:50 mM PBS,0.5 M NaCl)


3.高载量


在高流速情况下,Uni®Mab载量明显高于琼脂糖基质Protein A介质。甚至在4-6 min驻留时间下,载量也可超过琼脂糖类介质。下图为纳微Uni®Mab与国际知名厂商Protein A亲和介质载量对比。(测试条件:柱尺寸:7 mm × 25 mm;样品:Human IgG,2 mg/mL ;平衡:20 mM PBS,pH 7.0 ,0.15 M NaCl ;洗脱:0.1 M Glycine ,pH3.0)



4.高耐碱性,低配基脱落


Uni®Mab亲和层析介质能在pH 3-12范围内正常使用,可以使用0.1 M-0.5 M的NaOH进行填料清洗。在使用0.5 M NaOH 100次CIP(Clean-In-Place)循环实验后,IgG动态吸附载量仍然能保持初次使用时95%。 下图为Uni®Mab耐碱性状况。(测试条件:层析柱规格:7 mm × 25 mm;样品:重组表达的人鼠嵌合抗体 ;DBC计算:10% 流穿;平衡:20 mM PBS,150 mM NaCl, pH 7.2,3 CV(column volume);洗脱:20 mM Citrate,pH 3.0;CIP:0.5 M NaOH,15 CV;再平衡:10 CV)


应用案例


Uni®Mab 应用于实际抗体纯化时,显示较好的捕获能力。下图为Uni®Mab纯化实际样品中抗体效果图。(测试条件: 柱尺寸:7 mm × 25 mm;样品:血浆,5 mL ;上样及平衡缓冲液:20 mM PBS,pH 7.0 , 0.15 M NaCl ;洗脱:0.1 M Glycine ,pH3.0;驻留时间:4 min )


产品技术参数及规格


产品技术参数

骨架高机械强度、单分散多孔PMMA微球
粒径50um
配基耐碱性重组蛋白A
Human IgG 动态载量>35mg/mL(4min驻留时间)
推荐线性流速300-700cm/h
最大耐受压力72.5psi(5bar,0.5MPa)
pH稳定性3-12
使用温度4-40(摄氏度)
CIP清洗剂0.1-0.5M NaOH
储存20%乙醇,2-8摄氏度


预装柱规格

柱规格7mm*25mm
材质Polypropylene
柱体积1mL
Human IgG 动态载量>35mg/mL(4min驻留时间)
推荐流速0.25-1.0mL/min
最大操作压力43.5psi(3bar,0.3MPa)


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