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【好书推荐 5期】流式细胞术——原理、操作及应用(第二版)

检验医学 2019-05-01 02:42:19



书籍信息


陈朱波  曹雪涛  著

科学出版社  出版

ISBN  978-7-03-039097-4

定价:88.00元

  


作者简介


  


曹雪涛  


中国工程院院士,德国科学院外籍院士,美国国家医学科学院外籍院士。

1990年至2010年于第二军医大学担任免疫学教研室讲师、教授,免疫学教研室副主任、主任,第二军医大学副校长兼免疫学研究所所长、全军免疫与基因治疗重点实验室主任、医学免疫学国家重点实验室主任;

2010年8月至2011年8月任中国医学科学院、北京协和医学院副院校长;

2011年8月至2015年11月任中国医学科学院院长、北京协和医学院副校长;

2015年11月至2018年1月,任中国医学科学院院长、北京协和医学院校长;

2018年1月至今任南开大学校长。


长期从事抗感染天然免疫与炎症的基础研究、肿瘤免疫治疗转化应用研究,以通讯作者发表SCI论文240余篇,近五年来在《细胞》《自然》《科学》《自然—免疫学》等发表多篇研究论文,研制的树突状细胞疫苗临床试治晚期肿瘤患者完成了II期临床试验,并获得国家食药监局批文开展III期临床试验。他曾获得教育部长江学者成就奖(2005年)、中国工程院光华工程奖(2012)、中科院陈嘉庚生命科学奖(2016)。他培养的12名博士的论文获得全国优秀博士论文,他也因此获得首届中国研究生教育特等奖(2014)和Nature杰出导师终身成就奖(2015)。2006年由他创建并担任主任的医学免疫学国家重点实验室今年获全国创新争先十大团队奖牌。他担任中国免疫学会理事长、秘书长12年,曾任亚太地区免疫学会联盟主席、全球慢性疾病防控联盟主席等学术职务,为我国免疫学的发展作出了突出贡献。



内容简介


主要内容  










本书主要介绍流式细胞术的原理、操作及应用,分为概述、流式细胞仪的原理、流式图、流式细胞术的基本操作与技巧、流式分析术的应用和流式分选术的应用6个部分。概述部分介绍基本概念和几款常见的流式细胞仪,原理部分具体介绍流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统;流式图部分主要介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图;操作部分介绍了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理、分选模式选择、上样速度控制、分选设门原则、分选基本步骤等内容;流式分析术的应用部分具体介绍了流式细胞术在免疫学方面的应用,并且扩展到基础医学和生物学面的应用;流式分选术的应用部分阐述了不同条件下流式分选的策略选择和注意事项,同时还介绍了各种干细胞包括肿瘤干细胞等的流式分选方法。



适用人群  







本书特别适合于免疫学研究者和流式细胞术的初学者也可以作为有一定经验的操作者的参考书,对其他领域研究者也具有很好的参考价值。 



编辑推荐


专家推荐  






该书由中国工程院院士、中国医学科学院巴德年院士作序,使用了大量插图对各部分内容作了详细介绍,非常适合初学者使用。


出版背景  








流式细胞术是现代科学技术发展的综合交叉的产物,是集多种技术发展于一体的“大成者”。不仅应用于基础医学和生物学如免疫学、细胞生物学和微生物学等的各个领域,成为这些领域研究不可或缺的基本技术方法,更是广泛应用于临床的各个方面,如血常规检测、白血病的临床分型、急性感染的早起诊断等,还成功应用于环境监测、食品卫生防疫等各个方面。为了让流式细胞仪使用者能够全面地了解流式细胞术的原理、掌握其基本操作和技术、全方位地掌握流式分析和流式分选的应用,使流式细胞术更好地服务于基础和临床研究,也为了在全国更好地普及这项重要的技术,让更多的科技工作者掌握和使用流式细胞术,《流式细胞术——原理、操作及应用》应运而生。



图书特点  






该书的特点是深入浅出,通俗易懂,操作全面,理论联系实践,加强了流式分选的相关内容。全书从原理到技巧再到应用,层次分明,特别适合于流式细胞术的初学者,对于有一定经验的操作者也可查缺补漏,进一步加深对流式细胞术的全面理解、更好地使用流式细胞术。



再版内容  






该书为第二版,在第一版的基础上修改了部分文字,更为易读,同时增加了部分内容,主要有

关于流式通道的‘A’、‘W’和‘H’的含义以及流式细胞仪不同激光器激发的荧光进入不同光路分离系统的相关内容


流式检测值与实际值的误差产生的原因以及该误差的分布和对流式分析和分选的影响的内容

不同浓度Percoll的正确配制和常见错误配制方法,荧光素偶联抗体的保存方法,FSC和SSC通道电压调节方法及注意事项,PerCP荧光素与APC 荧光素需要调节补偿的原理等内容

标记CD4 T细胞时是否需要标记抗CD3流式抗体,高尔基体阻断剂莫能菌素,PMA和离子霉素的原理与应用,EdU掺入法检测细胞增殖annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡设置十字象限的注意事项,细胞自噬流式细胞术检测,新型膜结合型报告分子系统检测基因表达,双分子荧光互补结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合等内容

等。



目录

1  概述

    1.1  流式细胞术基本概念

    1.2  分析型流式细胞仪介绍

    1.3  分选型流式细胞仪介绍

参考文献

 

2  流式细胞仪的原理

    2.1  液流系统

    2.2  光路系统

    2.3  检测分析系统

    2.4  分选系统

参考文献

 

3  流式图

    3.1  流式通道

    3.2  流式直方图

    3.3  流式散点图

    3.4  流式等高线图

参考文献

 

4  流式细胞术的基本操作与技巧

    4.1  样品制备

        4.1.1  独立细胞样品制备

        4.1.2  免疫器官样品制备

        4.1.3  实体脏器样品制备

    4.2  荧光素偶联抗体及其标记方法

        4.2.1  荧光素

        4.2.2  荧光素偶联抗体

        4.2.3  样品封闭

        4.2.4  荧光素偶联抗体标记

    4.3  光电倍增管电压设定.

    4.4  对照的设置

        4.4.1  阴性对照的设置

        4.4.2  FMO对照

        4.4.3  阳性对照的设置

    4.5  补偿调节

        4.5.1  补偿调节的原理

        4.5.2  调节补偿的具体方法

        4.5.3  三色和四色分析补偿调节方法

        4.5.4  影响补偿大小的因素

    4.6  阈值设定

    4.7  流式分析中的死细胞问题

        4.7.1  减少样品中死细胞比例的方法

        4.7.2  流式分析时区分死细胞和活细胞的方法

    4.8  流式分选模式选择

        4.8.1  纯化模式

        4.8.2  富集模式

        4.8.3  单细胞模式

    4.9  上样速度控制

        4.9.1  流式分析速度控制

        4.9.2  流式分选速度控制

    4.10  分选设门基本原则

    4.11  流式分选基本步骤

参考文献

 

5  流式分析术的应用

    5.1  细胞群比例测定

    5.2  表型测定

    5.3  检测细胞因子

        5.3.1  胞内染色法检测细胞因子

        5.3.2  胞内染色法与 ELISA法比较

        5.3.3  CBA法测定细胞因子

        5.3.4  CBA法与 ELISA法比较

    5.4  检测细胞增殖

        5.4.1  相对计数法

        5.4.2  示踪染料标记法

        5.4.3  BrdU和EdU掺入法

        5.4.4  其他方法

    5.5  检测细胞凋亡

        5.5.1  annexin V/PI双染色法

        5.5.2  SYTO/PI双染色法

        5.5.3  细胞DNA含量分析法检测细胞凋亡

        5.5.4  线粒体损伤检测法

        5.5.5  活化的caspase-3检测法

        5.5.6  荧光素偶联的caspase抑制剂(FLICA)标记法

        5.5.7  甲酰胺诱导ssDNA单抗检测法

        5.5.8  TUNEL法

    5.6  检测细胞周期

        5.6.1  非特异性核酸荧光染料标记法

        5.6.2  特异性细胞周期调节蛋白检测法

    5.7  检测细胞杀伤能力

    5.8  检测细胞吞噬功能

    5.9  检测胞内活化的激酶

    5.10  检测细胞自噬

    5.11  检测基因表达

        5.11.1  GFP报告基因系统

        5.11.2  lacZ报告基因系统

        5.11.3  β-内酰胺酶报告基因系统

        5.11.4  新型膜结合型报告分子系统

    5.12  检测细胞内两种蛋白质的直接结合

        5.12.1  荧光共振能量转移结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合

        5.12.2  双分子荧光互补结合流式细胞术检测两种蛋白质的直接结合

    5.13  微生物学中的应用

        5.13.1  荧光素偶联抗体直接检测法

        5.13.2  抗体结合人工荧光微球直接检测法

        5.13.3  微生物活性流式检测

        5.13.4  人工微球荧光免疫试验检测抗体

        5.13.5  荧光原位杂交流式检测法

        5.13.6  PCR免疫微珠法

        5.13.7  原位PCR杂交流式检测法

    5.14  检测钙相关分子

        5.14.1  检测细胞内游离的钙离子水平

        5.14.2  检测钙蛋白酶活性

        5.14.3  检测细胞膜钙泵活性

    5.15  表观遗传学中的应用

        5.15.1  ChIP-on-beads 法

        5.15.2  检测细胞水平组蛋白修饰情况

    5.16  检测缝隙连接介导的细胞通讯

    5.17  检测细胞内pH值和钠氢转运体活性

        5.17.1  检测细胞内pH值

        5.17.2  检测钠氢转运体活性

    5.18  其他应用

        5.18.1  检测活性氧簇

        5.18.2  检测细胞内游离的锌离子水平

        5.18.3  检测端粒长度

        5.18.4  检测脂筏结合蛋白

引文目录

参考文献

 

6  流式分选术的应用

    6.1  流式分选与磁性分选

    6.2  流式分选独立群体细胞

    6.3  流式分选非独立细胞群体

    6.4  流式分选低比例细胞群体

        6.4.1  强势细胞群的辐射影响

        6.4.2  流式分选结合磁性分选

        6.4.3  二次分选法

    6.5  流式分选干细胞

        6.5.1  流式分选造血干细胞

        6.5.2  流式分选侧群干细胞

        6.5.3  流式分选间充质干细胞

        6.5.4  流式分选肿瘤干细胞

参考文献

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