如何让蛋白互作清晰可见?

2023-05-10 14:56:27

如何通过同一个实验即可完成对特定蛋白复合物的检测、定量以及确定细胞定位？答案是：Duolink PLA技术（即邻位连接分析技术），它可以帮助您在固定的细胞及组织样品中可视化蛋白质相互作用，所有这些相互作用均发生在内源蛋白质表达过程中。

这一系统包括两种标记了寡核苷酸的抗体，这些抗体分别针对发生互作的两个目标蛋白。如果这两个抗体相距40nm以内，即表示两个目标蛋白发生了相互作用。在这种情况下，抗体上标记的寡核苷酸就能够相互作用。在滚环扩增之后，人们可以通过荧光探针杂交，检测到上述事件，在原位观察到明亮的荧光点。

应用Duolink PLA技术研究蛋白互作的文章：

Nature doi:10.1038/nature13572

eIF4F is a nexus of resistance to anti-BRAF and anti-MEK cancer therapies　

Nature doi:10.1038/nature13623

Jam1a–Jam2a interactions regulate haematopoietic stem cell fate through Notch signalling

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