贝因美母乳研究中心论文(1)人乳中乳铁蛋白含量的初步检测分析

乳铁蛋白(lactoferrin，LF) 是一种相对分子质量为80000的糖蛋白, 由703个氨基酸组成, 其N端和C端分别组成2个球状结构，每个球状结构由2个α/β结构域组成 , 分别被称为N1、N2和C1、C2，共组成2个铁离子结合位点，每个位点可结合1个Fe³⁺和1个HCO₃^-或 CO₃^2-。国外大量研究表明，LF是一种多功能蛋白，其功能包括:调节肠道菌群, 调节铁平衡、增加铁吸收，减少下呼吸道疾病，抗细菌、病毒、真菌、寄生虫等微生物感，抑制肿瘤生长和转移等。LF主要存在于哺乳动物的各种外分泌物中 , 如乳汁、眼泪、唾液等，在初乳中的含量最高。Montagne等对法国哺乳期产妇的母乳样本进行检测，发现初乳中LF含量为5.8g/L，过渡乳3.1g/L，成熟乳2.2g/L。本研究通过酶联免疫吸附法(ELISA)，对中国产妇进行母乳中LF含量测定。

1.1 研究对象

36名产妇，身体健康，无妊娠和分娩并发症，平均年龄(27.44±3.26)岁。 所产婴儿均为足月儿，无窒息史, 平均出生体质量(3484.72±437.98)g。

1.2 标本采集及处理

采集产妇产后2、3d的初乳，6、7d 的过渡乳及42d的成熟乳各3ml，均在上午采集, 均为前段乳，用吸奶器吸取乳汁，放入无菌试管，置-80℃冰箱保存待测。 检测时, 标本经10000r/min离心10min(离心半径8cm)，去脂，取上清液5μl，用蒸馏水按1：100000稀释后，做双复孔加样检测LF含量。

1.3 检测方法

用ELISA双抗体夹心法,试剂盒为Hycult biotechnology bv的Human Lactoferrin ELISA 试剂盒。

1.4 统计学分析

应用 SPSS 11.0 统计学软件。初乳、过渡乳和成熟乳三组含量比 较采用秩转换的非参数检验Kruskal-Wallis 检验。初乳、过渡乳和成熟乳影响因素分析采用 Mann-Whitney 检验。

初乳组的LF含量最高，过渡乳组和成熟乳组依次降低，分别为初乳组 (2.63±1.11)g/L、过渡乳组(1.96±1.05)g/L、成熟乳组 (1.42±1.01)g/L，三组差异有统计学意义 (H=23.371，P<0.01)。

根据产妇的分娩方式不同分成剖宫产与顺产组，根据产妇年龄不同分成<28岁与≥28岁产妇组，分别进行初乳、过渡乳和成熟乳LF含量比较，不同分娩方式和不同年龄产妇初乳、过渡乳和成熟乳LF含量差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

LF作为一种具备多种生理功能的蛋白质，对于婴幼儿不可或缺，尤其在促进铁的吸收，预防婴幼儿缺铁性贫血，以及针对婴幼儿消化功能较弱，帮助婴幼儿抵抗大肠杆菌等微生物，降低病毒引起的腹泻等婴儿常见疾病方面，均起到重要作用。

LF是乳蛋白的主要成分, 占总乳蛋白的10%～15%，主要存在于乳清蛋白，故本次研究试验取乳清液测定LF。研究结果提示,母乳LF含量在初乳组中最高，过渡乳中降低, 成熟乳中更低。这种母乳LF含量的下降趋势与国外报道相符，但三组的含量测定值均低于国外水平，尤其是在初乳中的水平，明显低于国外报道。

目前关于人乳LF含量影响因素的研究报道较少。国外研究表明,人乳LF在吸烟组和不吸烟组无显著差异。澳大利亚Houghton等对土著居民与非土著居民的研究表明，母乳LF含量与种族无关，而与产妇的营养状况有关，营养状况好的产妇,母乳LF 含量较高。由于各国的饮食习惯和饮食结构有很大区别, 因而推断, 我国产妇的营养状况与国外产妇的差异可能是造成两者LF含量存在差异的原因之一。

另外, 在关于牛乳LF含量影响因素的研究发现, 牛乳LF含量受奶牛品种、年龄、胎次等因素影响，不同品种的奶牛，牛乳LF含量可相差3至4倍; 奶牛在第二胎次时牛乳LF含量是初产奶牛的2至3倍; 年龄大的奶牛LF含量低。由此推断，人乳LF含量可能也和产妇人种、胎次、年龄等因素存在关联。本研究中母乳LF含量均低于国外报道, 可能和人种差异、产妇年龄较大以及我国产妇大多为初产妇有关。

本次研究结果可能受到样本量较小和研究对象一般资料较少的影响, 也无法进一步从胎儿胎龄、胎次、产妇职业、生活环境等因素展开分析,因此需要扩大样本量, 进一步探讨对人乳LF含量造成影响的更多因素。