0、试表达情况：
1%接种量转接至两个试管培养，当培养至OD600为0.4～0.6时，一瓶加入终浓度为0.4 mmol/L 的IPTG，37℃诱导，另一瓶不加IPTG作为对照，均继续培养6 h，离心，收集细胞，进行SDS-PAGE检测。
1、诱导剂添加时间的影响：
按2%接种量接种，在37 ℃，200 r/min的条件下分别培养1、2、3、4、5、6 h，加入诱导剂IPTG进行诱导，并在每个时间段取样测大肠杆菌的菌浓OD600值，诱导完成后收集菌体，超声破碎后取上清检测，确定最佳诱导时间。
诱导剂添加时间与菌体生长密度有关，诱导剂添加的过早，IPTG会抑制菌体增殖，细菌从生长阶段进入表达阶段，但由于菌体密度较低，因而蛋白表达量不高。诱导剂添加的越晚，菌体密度越高，但菌体相对较老，蛋白表达效率也会降低。
2、诱导剂浓度的影响：
按2%接种量接种，在最佳诱导时间加入诱导剂IPTG，调整使其终浓度分别为0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 mmol/L，诱导完成后收集菌体，超声破碎后取上清检测，确定最佳诱导剂浓度。
诱导剂IPTG的浓度与蛋白表达的速度相关，在一定范围内高浓度的IPTG会加快蛋白的表达，但是IPTG具有一定的细胞毒性，浓度过高时会降低细胞的活性，抑制细胞增殖。
3、诱导温度的影响：
按2%接种量接种，在最佳诱导时间加入诱导剂IPTG，调整使其终浓度为上述最佳诱导浓度，设置诱导温度分别为16、20、27、32、37、42、45 ℃，诱导完成后收集菌体，超声破碎后取上清检测，确定最佳诱导温度。
在诱导表达时，较低的温度下菌体生长缓慢，蛋白表达的速率低，蛋白表达的时间延长。升高温度，菌体生长速度加快，表达速率提高，但温度过高时蛋白的表达受到抑制。
4、诱导时间的影响：
按2%接种量接种，在最佳诱导时间加入诱导剂IPTG，调整使其终浓度为最佳诱导浓度，在上述最佳温度条件下分别诱导2、4、6、8、10、12 h,诱导完成后收集菌体并破碎细胞，检测抑制剂活性，确定最佳诱导时间。
当诱导时间为2～8 h时，菌体密度逐渐升高，蛋白合成旺盛，抑制剂活性随诱导时间的延长而提高，在8 h时达到最高值，当诱导时间超过8 h时，菌体由于生长时间过长而衰退，抑制活性开始逐渐降低，确定8 h作为该基因工程菌的最佳诱导时间。
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