用含有相应抗生素的LB培养基振荡培养大肠杆菌过夜,将培养物转移至1.5mL离心管内。 用台式固定角转子离心机12000 rpm离心1分钟,将上清液倒出,并用移液器吸取残余培养基。 剩下的沉淀即为大肠杆菌
取马铃薯块茎200克,加入2.5倍体积的匀浆缓冲液,匀浆后用4层纱布过滤。滤液经4000rpm离心10分钟 ,收集上清液。 上清液13800 g(相对离心力RCF,即重力加速度g的倍数)离心15分钟收集沉淀,用缓冲液重悬并加入终浓度为15mmol/L的氯化镁。 经DNase I处理后,加入2倍体积的缓冲液,13800 g离心15分钟收集沉淀,即为线粒体。
速度区带离心 等密度梯度离心
类似于速度区带离心,即离心管中预先放置梯度介质,样品直接加在梯度液面上; 样品预先与梯度介质溶液混合后装入离心管,通过离心介质自发形成密度梯度。
其中CsCI最大密度可达1.7g/cm3,但由于具有较高的渗透压,通常用于核酸等大分子的纯化。 然而,Percoll具有渗透压低、黏度小、密度高等特点,适合分离活细胞。