旗帜课堂 和你一起学习《乳品中生物活性物质功能与应用》之生物活性乳蛋白的分级和分离

2023-05-10 14:56:27


《乳品中生物活性物质功能与应用》

【美】 杨W.帕克(Young W.Park)著

陈合 舒国伟 陈立 等译

03

PART

THREE


对乳源蛋白质的生物特性越来越多的了解,促进了对这些成分的纯化或浓缩等技术的开发。正常牛乳中约含3.5%蛋白质,其中酪蛋白成分约80%、乳清蛋白20%,牛酪蛋白进一步分为:α-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。

各种色谱级膜分离技术,已经被开发用于β-酪蛋白的分离上,这是由于β-酪蛋白的潜在应用价值,例如在婴儿配方奶粉中。然而到目前为止,以饮食为目的的酪蛋白工业化生产,并没有任何显著性发展。

酪蛋白由于含有宝贵的氨基酸、钙、磷和多种微量元素而被认为具有很好的营养价值,个别的酪蛋白成分已被证明具有生物活性,同时也是不同生物活性肽的极好来源。

牛乳乳清中含有多种的蛋白质,这些蛋白质彼此在化学结构、功能特性和生物功能上都不相同,这些特征用于单个蛋白质的分类,但是在评价一个纯化组分的生物活性时,纯度是一个关键因素。

膜分离过程,如超滤、反渗透和渗滤等,现在被应用于普通乳清粉末的工业化生产中,并且乳清蛋白的浓缩物中有30%-80%的蛋白质含量,凝胶过滤和离子交换血谱技术,可用于乳清分离蛋白的生产中,这种方法分离的乳清蛋白中,有90%-95%的蛋白质含量,乳清分离蛋白的化学成分及功能,在很大程度上受到了使用过程中方法的影响,其生物学特性也受到影响并且很难将其标准化,这是由于不同蛋白质的生物活性性质的复杂性。

因此越来越多的人愿意为纯乳清蛋白的分离而开发特定的技术、工业或半工业规模的处理技术,已经可以用于主要天然乳蛋白的分类和分离,例如α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、免疫球蛋白、乳铁蛋白及糖巨肽、在最近的文献中对现有和潜在的技术进行了综述。

最近就天然α-乳白蛋白的分离叙述了一种新的方法,他们对源于甜乳清的α-乳白蛋白进行了膜过滤以及将透过液用胰蛋白酶进行了处理,经过对水解物进行二次超滤及渗透之后,计算出的α-乳白蛋白的总回收率高达15%,纯度为90%-95%。

另外一种最新的方法,可以将β-乳球蛋白从乳清中分离出来,这种方法利用离子交换色谱,以硫酸铵阳离子进行分级沉淀,其后使用阳离子交换色谱进行分离,该方法纯化β-乳球蛋白的总收率为14.3%,且纯度高于95%。

蛋白组学的进步促进了蛋白组技术的发展,例如使用二维凝胶电泳对乳清蛋白进行表征,利用这项技术,首先通过半配对阴离子和阳离子交换色谱法,对牛乳乳清进行初次分级后,又发现了大量的次要乳清蛋白。这种蛋白组展示技术,在未来纯化的设计和策略上看起来是有用的,尤其是对所选择的牛乳蛋白或其含有目标生物活性的组分。


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